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1、高表达载体构建
将目的基因重组到自主表达载体，质粒上除了目的基因外还带有抗性基因，比如抗生素抗性基因，这样在转染后就可以利用选择性压力富集整合质粒的细胞。在哺乳动物细胞中质粒不能复制，未整合到基因组中的质粒随着细胞分裂逐渐丢失，在一段时间的选择压力之后，所有存活下来的细胞基因组中都整合了外源基因。
2、细胞株转染
将表达载体转染至CHO中，或转染至客户指定细胞中，可提供瞬时转染制备小量样品；脂质体或电转细胞筛选稳定细胞株，做多次转染，以满足筛选到高产细胞株。
3、高表达pool筛选
细胞转染后，通过筛选获得稳定高产细胞pool，如CHO以MTX加压筛选，通过多轮压力筛选，细胞完成恢复后，评估pool的的重组蛋白的产量和质量，至少3个pool用于单克隆细胞筛选。
4、单细胞克隆筛选
将经pool筛选后的细胞接种到半固体培养基中，通过clonepix的荧光识别，筛选接种细胞，每个pool挑取200个克隆，经表达量评估后，每个pool淘汰后剩余10-20个克隆，这些克隆不断扩大培养至摇瓶，摇瓶通过批次评价（生长曲线和表达量），最终剩余3-5株细胞。
5、流加评估高产克隆
将3-5株细胞送至工艺培养部以生物反应器进行评估，通过流加工艺的研究和评估，以重组蛋白产量和关键蛋白属性指标评估蛋白质量，获得最终生产细胞株，该细胞株可用于构建原始细胞库、主细胞库和工作细胞库。
6、细胞传代稳定性研究
评估原始细胞库的蛋白表达量和蛋白质量稳定性在细胞传代至少60代次后的稳定性。原始细胞库、主细胞库和工作细胞库的靶基因遗传稳定性需通过全长cDNA序列测序进行鉴别；各库的靶基因拷贝数和插入位点也将检测；
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