|
本平台擅长各种重组蛋白的分离纯化，建立了成熟的技术路线，主要包括以下内容：
1、标签蛋白的分离纯化
为了纯化方便，需要表达的重组蛋白往往加上一些标签，如Flag，His等。表达出来的标签蛋白纯化相对来说是比较简单的，只需经亲和层析后纯度通常能达到90%以上，根据需要可在亲和层析后接或者不接一步离子交换，最后进行凝胶过滤即可制备纯品了。
2、非标签蛋白的分离纯化
非标签蛋白的纯化较标签蛋白的纯化复杂的多，因为亲和层析的特异性是最强的，其他层析相对来说弱一些，故蛋白的分离较为困难，往往需要多步层析才能达到想要的纯度，回收率也会相对较低。
本平台具有获得高纯度的非标签蛋白如各种细胞因子等的实际纯化经验，纯化后的蛋白纯度高达98%（HPLC检测）。
3、包涵体蛋白的分离纯化
很多重组蛋白在表达的过程中容易形成包涵体，给分离纯化造成一定的困难，因为包涵体蛋白往往需先经过变性复性后方能进行柱层析，而其柱层析的分离路线则和非标签蛋白类似。本平台凭借多年的包涵体重组蛋白的分离纯化经验，能将该类蛋白的纯度做到98%（HPLC），回收率达20-30%。
|